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在非生物脅迫下提高作物生產(chǎn)力是農(nóng)業(yè)科學界面臨的最大挑戰(zhàn)之一。盡管進行了廣泛的研究,但對非生物抗逆作物商業(yè)轉(zhuǎn)移率的研究產(chǎn)出很低。這主要是由于基因型×環(huán)境相互作用的復雜性,特別是能夠量化植物對動態(tài)環(huán)境的動態(tài)生理反應能力。大多數(shù)現(xiàn)有的表型分析設備使用機器人和自動圖像采集和分析來收集信息。然而,它們直接測量整株植物生理特性的能力是有限的。我們展示了一種高通量功能表型系統(tǒng) (HFPS),該系統(tǒng)能夠比較植物在動態(tài)環(huán)境中對不同環(huán)境條件的動態(tài)響應,因為它可以直接和同時測量幾種處理下與植物的產(chǎn)量相關(guān)生理性狀。該系統(tǒng)被設計為一對一 (1:1) 的植物單元[傳感器+控制器],即每個單獨的植株都有自己的個性化傳感器、控制器和灌溉閥,能夠(i)以高時空分辨率監(jiān)測每株植物的水關(guān)系動力學——以及植株整個生命周期內(nèi)的環(huán)境響應,(ii)由于每株植物的多個獨立處理方案,采用了真正的隨機實驗設計,以及(iii)由于植物或其他物體的靜止性而減少人為環(huán)境干擾。此外,我們提出了兩個新的彈性量化相關(guān)性狀,也可以使用 HFPS 進行表型分析:蒸騰恢復率和夜間水分重吸收。我們使用HFPS篩選了兩種商業(yè)生物刺激劑(海藻提取物-ICL-SW和代謝物配方-ICL-NewFo1)在不同灌溉制度下對辣椒生長的影響。生物刺激劑被認為是提高作物生產(chǎn)力的一種替代方法。然而,它們復雜的作用模式需要具有成本效益的田間表型鑒定。兩種處理方式(生物刺激劑和干旱)的組合使我們能夠評估系統(tǒng)在研究生物刺激劑對耐旱性影響方面的精度和分辨率。我們分析和討論植物在不同階段的行為特征,并評估生產(chǎn)力和恢復力之間的懲罰和權(quán)衡。在這個測試案例中,我們提出了一個篩選生物刺激劑生理作用機制的方案。
圖1.實驗裝置
(A) 隨機實驗裝置陣列視圖,由 72 個裝有辣椒植株的測量單元組成。
(B) 系統(tǒng)框圖。實心圓圈 - 灌溉良好的植株;空心圓圈 - 干旱恢復條件下的植株。綠色 - ICL-SW 處理過的植株,橙色 - ICL NewFo1 處理過的植株,藍色 - 對照(無生物刺激劑)植株。所有盆栽表面都被覆蓋以減少蒸發(fā),灌溉通過多出口滴頭注入土壤,以確保灌溉施肥和生物刺激素的均勻分布。
圖2.在整個實驗過程中,大氣條件和實驗進度以系統(tǒng)相對重量表示
采用隨機實驗設計,定量比較兩種生物刺激劑(海藻提取物ICL-SW和代謝物配方ICL-NewFo1)對植物關(guān)鍵生理特性的影響。在兩種灌溉條件下下,比較了兩種生物刺激劑與對照(無生物刺激劑)的效果:(i)灌溉良好,和(ii)干旱脅迫,從灌溉良好時期開始,然后是控制干旱期和連續(xù)恢復期(圖2B)。
圖3.生物刺激劑對植物蒸騰作用的影響
在良好灌溉期間,所有六組的日蒸騰量均逐漸增加(圖3A)。而在實驗第13天開始的干旱處理期間,植株的日蒸騰量和VWC逐漸減少(圖3A、B)。在實驗第31天(恢復期)恢復灌溉后,日蒸騰量和VWC快速增加(圖3A、B)。干旱臨界值(定義為開始限制蒸騰速率的土壤VWC值 [臨界VWC,(θc)])是為遭受干旱的植物確定的(圖3C)。對照組和兩種生物刺激劑處理VWC值為θc = 0.15,但由于ICL SW處理的植物與其他兩組相比VWC下降的模式不同(圖3B),二者在不同的時間達到了θc,對照和ICL-NewFo1處理的植株在第22.5天達到θc,ICL-SW處理植物在第21天達到θc(圖3B、C)。在第27-29天干旱對處理和未處理植株每日蒸騰速率模式的影響(相對于三個充分灌溉組的蒸騰速率模式)如圖3D所示,這表明ICL SW處理的植株在干旱條件下午間(1200至1400小時)的蒸騰速率顯著降低,但在充分灌溉條件下達到了明顯較高的蒸騰速率(圖3E)。在充足的灌溉條件下,ICL-NewFo1處理的植株蒸騰速率介于對照和ICL-SW處理之間,并且在干旱條件下蒸騰速率也有類似的降低(圖3E)。
圖4.在整個試驗期間,平均值±SE計算的整株重量
通過使用所有六組在整個試驗期間(36天)計算的植物重量,將蒸騰作用標準化為生物量(圖4A)。六個組在充分灌溉期間的植株增重率相似,并且三個干旱脅迫組在干旱期間下降。在恢復期,后兩組的重量增加率再次開始增加(圖4A)。然而在試驗結(jié)束時,ICL SW處理的植株在后一階段的增重率較高,導致干枝生物量顯著高于對照,這可能是由于這種趨勢的累積效應(圖4B)。對于灌溉良好和缺水的植物,地上部分的干生物量與累積日蒸騰量(即與干重相關(guān)的WUE)之間的相關(guān)性相對較高(R2>0.8)(圖4C)。盡管ICL SW處理的植株蒸騰速率較高,但其蒸騰作用歸一化為植株重量E(圖4D),與對照在充分灌溉條件下的蒸騰作用相似。同樣,ICL SW處理的植株在干旱條件下表現(xiàn)出的午間蒸騰速率(圖3E)。在充分灌溉條件下,與對照相比,生物刺激劑處理的植株測得的蒸騰速率(圖3E)和干枝生物量(圖4B)較高,表明與鮮重相關(guān)的水分利用效率有所提高。然而,這種改善(增加~ICL SW治療和~ICL-NewFo1處理過的植物的14%)不顯著(圖4E)。
圖5.生物刺激劑對植物恢復力的影響
估測植物從干旱脅迫中恢復需要考慮兩個特征:(i)全株蒸騰恢復:恢復灌溉后日蒸騰增加的速率與干旱期間日蒸騰減少的速率相比較。圖5A顯示了這兩種速率的數(shù)據(jù)點,表明與對照和ICL-NewFo1處理的植株相比,ICL-SW降低了植株的恢復力(圖5B)(ii)夜間水分再吸收(即恢復白天損失的水),分別如圖5C-F所示。與對照組相比,生物刺激劑處理的植株在預處理期間的夜間水分重吸收顯著更高,用ICL-NewFo1處理植株的夜間水分重吸收值最高(圖5C)。干旱脅迫降低了三組恢復期夜間水分的再吸收能力。然而,與對照組相比,生物刺激劑提高了恢復期間的再吸收能力,ICL-NewFo1處理的植株再吸收能力最高(圖5E)。當夜間水分重吸收標準化為植物重量時,觀察到類似的趨勢,與對照相比,ICL-NewFo1處理過植株的重吸收能力明顯是最高的(圖5D,F(xiàn))。